发布网友 发布时间:2022-04-25 19:11
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热心网友 时间:2022-06-02 13:25
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DAPI染色不能区分活死细胞,因为DAPI可以透过完整的细胞膜,它可以用于活细胞和固定细胞的染色。活细胞死细胞都能够被DAPI染色,所以光看到蓝色荧光,无法区分。
DAPI是一种能够与DNA强力结合的荧光染料,常用于荧光显微镜观测。类似于DAPI技术,赫斯特染色是一种既可以用于活细胞也可以用于固定细胞的蓝色荧光染料,并且可以使用与DAPI相同的机器滤镜设置。
扩展资料:
原理:
DAPI 是一种能够与DNA强力结合的荧光染料。它结合到双链DNA小沟的AT碱基对处,一个DAPI分子可以占据三个碱基对的位置。结合到双链DNA上DAPI分子的荧光强度提高大约20倍,常用与荧光显微镜观测,根据荧光的强度可以确定DNA的量。
历史背景:
1971年DAPI在一项关于制抗锥虫病的药物的研究中第一次被合成于OttoDann的实验室。它虽然不是一种成功的药物,但更深入的研究表明它与DNA强力结合并在此时发出更强的荧光,这导致了1975年它被用在超速离心分析法中以标记线粒体DNA。
与DNA结合时激发的强荧光使它被广泛用于荧光显微镜技术中对DNA的染色。上世纪70年代末证实DAPI可以被用来在植物,微生物,多细胞动物和细菌细胞中追踪DNA,1977年证实它可以被用来定量给细胞中的DNA染色,同时也证实DAPI可在流式细胞术中用作DNA染料。
参考资料来源:百度百科-DAPI
热心网友 时间:2022-06-02 13:26
DAPI能快速进入活细胞中与DNA结合,因此DAPI对生物体而言,也被视为一种毒性物质与致癌物。CM-Dil是标记细胞膜的,而DAPI是标记细胞核的
可以是活细胞,一人做兔子的膀胱肿瘤,他说在14天的时候很强,21天的时候比较弱,再长的时间就没有检测过。
文献上说50天以后还可以看到DAPI的标记
热心网友 时间:2022-06-02 13:26
一楼的意思是活细胞死细胞都能够被DAPI染色。所以光看到蓝色荧光,判断不出来。
但听说死细胞染色比较快。活细胞的话DAPI进入会相对困难一些。
再者DAPI有毒性,所以活细胞被进入之后多久会死掉,也是个问题。
总之,DAPI染色不适合用于判断细胞的活性。