发布网友 发布时间:2022-04-26 21:51
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热心网友 时间:2023-11-07 09:36
您这题目太大了。
几种常用的植物转基因方法
BIOX.CN 2005-5-19 16:54:41 来源:生命经纬
遗传转化的方法按其是否需要通过组织培养再生植株可分成两大类,第一类据要通过组织培养再生植株,常用的方法有农杆菌介导转化法、基因*法;另一类不需要通过组织培养,目前比较成熟的主要有花粉管通道法。
1农杆菌介导转化法
农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌,它能在自然条件下趋化性地感染大多数双于叶植物的受伤部位,并诱导产生冠痪瘤或发状根。根想农杆菌和发根农杆菌细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒,其上有一段T—DNA,农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后,可将T—DNA插入到植物基因组中。因此,农杆菌是一种天然的植物遗传转化体系。人们将目的基因插入到经过改造的T—DNA区,借助农杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移与整合,然后通过细胞和组织培养技术,再生出转基因植株。 农杆菌介导法起初只被用于双于叶植物中,近年来,农杆菌介导转化在一些单子叶植物(尤其是水稻)中也得到了广泛应用。
2基因*介导转化法
利用火药爆炸或高压气体加速(这一加速设备被称为基因*),将包裹了带目的基因的
DNA溶液的高速微弹直接送入完整的植物组织和细胞中,然后通过细脑和组织培养技术,再生出植株,选出其中转基因阳性植株即为转基因植株。与农杆菌转化相比,基因*法转化的一个主要优点是不受受体植物范围的*。而且其载体质粒的构建也相对简单,因此也是目前转基因研究中应用较为广泛的一种方法。
3花粉管通道法
在授粉后向于房注射含目的基因的DNA溶液,利用植物在开花、受精过程中形成的花粉管通道,将外源DNA导入受精卵细胞,并进一步地被整合到受体细胞的基因组中,随着受精卵的发育而成为带转基因的新个体。该方法于印年代初期由我国学者周光字提出,我国目前推广面积最大的转基因抗虫棉就是用花粉管通道法培育出来的。该法的最大优点是不依赖组织培养人工再生植株,技术简单,不需要装备精良的实验室,常规育种工作者易于掌握。
热心网友 时间:2023-11-07 09:36
1,提取目的基因,2,基因表达载体的构造,3,将目的基因导入受体细胞,4,目的基因的检测