发布网友 发布时间:2024-10-23 03:42
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热心网友 时间:2024-11-01 14:20
神经元细胞在神经组织中占据核心地位,作为神经系统的基本构建单元。神经胶质细胞包括中枢神经系统的星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞,以及周围神经系统中的施万细胞和脊神经节内的卫星细胞。深入研究神经组织依赖于对其细胞多样性的理解,现代测序技术推动了细胞分类学的发展,使得在特定细胞类型中基因表达变得关键。
利用AAV载体实现神经元细胞特异性基因,策略主要涉及血清型选择、组织特异性启动子和注射方式。AAV的12种血清型和多种变体因其对组织的亲和性差异,可用于不同组织感染。通过改造AAV2 RC质粒,可以得到不同血清型的重组AAV,如AAV-Retro和AAV-BBB,后者可通过静脉注射穿越血脑屏障,针对全脑进行感染。
选择合适的血清型的同时,利用组织特异性启动子如hSyn(人类Synapsin I基因启动子)、Mecp2、TUBA1A、c-fos、CaMKII、hVGAT或TH,可以进一步提高基因在特定神经元细胞内的表达。例如,hSyn启动子常用于早期神经元,而CaMKII启动子则对兴奋性神经元有专一性。实验研究中,这些启动子常结合AAV病毒如AAV9,通过脑立体定位、背根神经节注射等方式实现基因的特异性表达。
最后,不同的注射方式如脑立体定位、脑室注射和脊髓内注射,提供了针对不同脑区的精确手段。以AAV9脑立体定位注射为例,可以结合血清型和特异性启动子,精确地在小鼠海马区实现基因表达。汉恒生物提供多种血清型和定制化的工具,以满足不同研究需求。